賽(sài)分(fēn) Sepax BR-C18 液相(xiāng)色(sè)譜(pǔ)柱(zhù) 4.6mm×150mm 簡介

SRT SEC鍵合(hé)固定相采用表麵(miàn)修飾(shì)技術(shù)，通過(guò)在高純度具(jù)有(yǒu)良(liáng)好機(jī)械穩定性的矽膠(jiāo)基(jī)質(zhì)上，鍵合(hé)一層(céng)均匀的納米厚度中(zhōng)性親(qīn)水(shuǐ)薄膜(mó)而(ér)製(zhì)備得(dé)到。工(gōng)藝采用可控(kòng)的化學修飾技(jì)術，因(yīn)此能確保柱與柱(zhù)之(zhī)間(jiān)有著可靠的重現性。SRT填料(liào)采用(yòng)化學(xué)鍵合(hé)技術(shù)，表(biǎo)麵親水(shuǐ)塗層覆(fù)蓋，因(yīn)此(cǐ)不僅(jǐn)具有優異的(dí)穩定性(xìng)，而且(qiě)對蛋(dàn)白(bái)等生物樣(yàng)品(pǐn)的非(fēi)特(tè)異(yì)性吸附作用也非常小。精心設計的大(dà)孔(kǒng)體積可(kě)保證(zhèng)高(gāo)的分(fēn)離容量(liáng)以(yǐ)及(jí)優(yōu)異(yì)的(dí)分(fēn)辨率。由於(yú)采(cǎi)用創新的(dí)表(biǎo)麵(miàn)化學技術(shù)，以(yǐ)及(jí)擁有多(duō)種(zhǒng)孔(kǒng)徑(jìng)規格(gé)（從100Å到2000Å），SRT SEC柱可(kě)為各(gè)種分離應用提(tí)供最高分(fēn)辨率和最(zuì)大回(huí)收率。應用(yòng)領(lǐng)域覆(fù)蓋(gài)了大分子量(liáng)的生(shēng)物分(fēn)子（如蛋白(bái)質(zhì)，核酸(suān)），小(xiǎo)分子量的生物(wù)分(fēn)子（如(rú)多肽，寡(guǎ)核苷(gān)酸(suān)），天(tiān)然聚合物（如(rú)多(duō)糖(táng)），合成聚合(hé)物(wù)，生物(wù)細(xì)胞（如(rú)細(xì)菌(jūn)和(hé)病毒(dú)），納米(mǐ)材(cái)料（如(rú)納米(mǐ)顆(kē)粒(lì)）等。

特(tè)點:

● 高(gāo)柱容(róng)量，高分辨率
● 寬的pH範圍(wéi)(pH範圍2-8.5)
● 使用壽命長(cháng)
● 低鹽濃度(dù)洗脫，適(shì)合(hé)LC-MS分析
● 對(duì)於生物(wù)樣品(pǐn)無(wú)強吸附
● 極低的非特異性(xìng)吸(xī)附，高(gāo)的蛋白回(huí)收(shōu)率及(jí)活性回收率
● 解(jiě)決(jué)多維色譜分(fēn)析(xī)應用(yòng)

賽分 Sepax BR-C18 液相色(sè)譜(pǔ)柱 4.6mm×150mm

色(sè)譜(pǔ)柱的安裝(zhuāng)和操作(zuò)

色(sè)譜柱在運輸(shū)過程中或(huò)在沒有使(shǐ)用時，它(tā)的(dí)兩(liǎng)端(duān)總是用 堵(dǔ)頭進行(háng)密(mì)封。當將色(sè)譜(pǔ)柱接入色(sè)譜儀(yí)器(qì)係統時(shí)，首先(xiān)移去 兩(liǎng)端(duān)的堵頭。請注(zhù)意將(jiāng)流(liú)動(dòng)相流動的方向(xiàng)與柱(zhù)上(shàng)標(biāo)記的方向 保持(chí)一(yī)致(zhì)。除(chú)非(fēi)出於特殊(shū)考慮，例如為了(liǎo)清除(chú)堵(dǔ)在色譜柱入 口端的髒汙等而(ér)需要將色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)反(fǎn)接以進行(háng)衝(chōng)洗時，建議用戶 在(zài)接上(shàng)色(sè)譜(pǔ)柱時一定要遵循(xún)柱上(shàng)標記的方向。由於色譜(pǔ)柱的(dí) 連(lián)接(jiē)是(shì)整個(gè)色譜(pǔ)操作過(guò)程的(dí)一部(bù)分，如果密封(fēng)卡(qiǎ)套過緊(jǐn)，或 安(ān)裝不合(hé)適，或者(zhě)密(mì)封卡套與(yǔ)色譜柱端口(kǒu)不匹(pǐ)配(pèi)，都(dū)有可能(néng) 導致溶液(yè)的泄(xiè)漏。請(qǐng)按(àn)照(zhào)下(xià)麵步驟將色(sè) ，從而(ér)將(jiāng)色譜(pǔ)柱(zhù)接(jiē)入 HPLC 係統： (a) 第一(yī)次使(shǐ)用(yòng)的管(guǎn)綫，請依次(cì)將管綫接頭和(hé)密封卡(qiǎ)套(tào)裝在 徑(jìng) 1/16"的管綫上。密(mì)封卡(qiǎ)套的寬口(kǒu)端(duān)應朝向(xiàng)管綫接(jiē)頭(tóu)。 (b) 將(jiāng)管綫緊緊插入(rù)色(sè)譜柱的接(jiē)口(kǒu)，向前滑(huá)動(dòng)密(mì)封卡(qiǎ)套和(hé)管 綫(xiàn)接頭，並使管(guǎn)綫(xiàn)接頭的(dí) ，然後(hòu)擰緊管綫接頭(tóu)。 (c) 在用(yòng)力將(jiāng)管綫壓(yā)入 螺帽(mào)再(zài)進(jìn)一步緊固。 ) 對色(sè)譜柱的另(lìng)一(yī)端采用上(shàng)述方法進(jìn)行操(cāo)作。 新的 Sepax AAA 柱(zhù)是(shì)置於甲(jiǎ)醇（或(huò)乙腈(jīng)）水溶(róng)液(yè)中(zhōng)運(yùn)輸(shū) 的，在儲(chǔ)存和運輸(shū)過(guò)程(chéng)中，矽膠填料可能(néng)會幹(gān)涸。這時推(tuī)薦 用 10-20 倍柱(zhù)體(tǐ)積的(dí)純有(yǒu)機溶劑如(rú)甲醇(chún)，乙腈(jīng)進行(háng)衝(chōng)洗(xǐ)以活化色譜(pǔ)柱(zhù)。接著可(kě)用用(yòng)戶自己選擇的流(liú)動(dòng)相衝(chōng)洗色譜柱。流 速由(yóu) 0.1mL/min 逐漸(jiàn)升(shēng)至所(suǒ)需(xū)的(dí)操(cāo)作條(tiáo)件(jiàn)，直至基綫(xiàn)穩(wěn)定為 止。如(rú)果柱壓(yā)和(hé)基綫波(bō)動較大，這可能(néng)是氣泡(pào)進入(rù)了色譜(pǔ)柱中這時可(kě)用較高(gāo)流(liú)速衝洗色譜柱 2-5 分鐘，例如對於(yú) 4.6x250 mm 的色譜(pǔ)柱可(kě)采(cǎi)用(yòng)流(liú)速(sù) 1.5mL/min。

樣品(pǐn)和流動相

為(wéi)了(liǎo)避(bì)免(miǎn)色譜(pǔ)柱的堵塞，所有樣品(pǐn)和(hé)溶劑(jì)，包括緩衝(chōng)溶(róng) 液(yè)在內，都必(bì)須在使用前用(yòng) 0.45 μm 或 0.2 μm 的濾膜過濾。 Sepax AAA 鍵合固定相的性質為(wéi)非極性，推(tuī)薦流動相為有機 試劑(jì)與水(shuǐ)的混(hùn)合(hé)物（如甲醇(chún)或乙腈的(dí)水溶(róng)液(yè)等(děng)）。流動相(xiāng)在 使用前需要脫(tuō)氣。一(yī)個(gè)簡單(dān)的(dí)脫(tuō)氣方法(fǎ)是(shì)將(jiāng)流(liú)動(dòng)相在(zài)水泵形成的真空(kōng)下(xià)超聲 5 min。當 Sepax AAA 柱用於(yú)梯(tī)度洗脫(tuō) 時(shí)，起(qǐ)始流動相通(tōng)常為 5%甲(jiǎ)醇（或乙腈）。

色譜柱的保護

pH 避免在(zài) pH 低於 2 或(huò)高於(yú) 11 的條件(jiàn)下(xià)使(shǐ)用 Sepax AAA 柱(zhù)。較高(gāo)的(dí) pH 會溶(róng)解(jiě)矽膠(jiāo)，從而(ér)使部分(fēn)或全部(bù)的烷基 鏈(liàn)從矽膠表(biǎo)麵脫(tuō)落，引(yǐn)起分(fēn)離效率的 。為(wéi)了獲(huò)得最佳(jiā)的(dí)分離效果(guǒ)和延長柱的(dí)使(shǐ)用(yòng)壽(shòu)命，請(qǐng)盡(jìn)量(liáng) 使用 pH 在(zài) 3 - 7.5 範圍內(nèi)的流(liú)動相。

壓力 盡(jìn)管 Sepax AAA 柱(zhù)可(kě)在(zài)高(gāo)至 5000psi 的(dí)壓力(lì)下使(shǐ) 用(yòng)，但正常(cháng)的操(cāo)作壓力應當低於 3000psi。長時間在高壓下(xià)運 行(háng)會損(sǔn)壞色譜柱(zhù)。由於壓(yā)力來源於流(liú)速(sù)，因(yīn)此最(zuì)大 流(liú)速(sù)將受製於(yú)係統所能承(chéng)受(shòu)的(dí)壓力(lì)。一般而(ér)言，柱壓(yā)會(huì)隨著(zhuó) 色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)使(shǐ)用時(shí)間的(dí)增加(jiā)而逐漸增加。壓(yā)力突(tū)然增加(jiā)預示色譜柱入口端(duān)的篩板(bǎn)發生了堵塞。在(zài)這種情況下，建(jiàn)議將色(sè)譜柱(zhù) 反接後(hòu)用(yòng)適(shì)宜的(dí)溶(róng)劑進行衝(chōng)洗(xǐ)。

溫(wēn)度(dù)

最高操(cāo)作溫(wēn)度為 60o C。長時間在高(gāo)溫(>75o C)下操作 也(yě)會(huì)損(sǔn)壞(huài)色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)，這種情形在高的pH (>8)條件(jiàn)下(xià)特(tè)別突出(chū)。

儲藏 長期不用時，請(qǐng)不要讓水或緩衝(chōng)液存(cún)留在色譜(pǔ)柱 中。在(zài)替代緩(huǎn)衝(chōng)液時，請(qǐng)用至(zhì)少 20-30 倍柱體積的 50%甲醇 （或(huò)乙(yǐ)腈）水(shuǐ)溶液(yè)衝洗色譜柱，再(zài)用 20-30 倍柱體積(jī)的(dí)純有機(jī)溶劑如已(yǐ)睛進行衝洗。每(měi)根(gēn)色譜柱在運(yùn)輸(shū)過程(chéng)中(zhōng)均會附(fù)有(yǒu) 兩個可拆卸(xiè)的堵(dǔ)頭。為(wéi)了防止(zhǐ)柱床幹涸，請用堵頭(tóu)塞(sāi)緊色譜柱(zhù)的兩端(duān)。