賽分(fēn) Sepax HP-C18 液相(xiāng)色(sè)譜柱(zhù)4.6mm×250mm 簡介

SRT SEC鍵(jiàn)合固(gù)定相采(cǎi)用表麵修(xiū)飾(shì)技術，通過在高純(chún)度具(jù)有(yǒu)良(liáng)好機械穩定性(xìng)的(dí)矽膠(jiāo)基質(zhì)上，鍵合(hé)一層均匀(yún)的(dí)納(nà)米厚度中性(xìng)親(qīn)水薄(báo)膜(mó)而(ér)製(zhì)備得到(dào)。工藝采用可控的化(huà)學修(xiū)飾技術，因(yīn)此(cǐ)能(néng)確保柱與柱之間有(yǒu)著(zhuó)可(kě)靠的(dí)重現(xiàn)性。SRT填料(liào)采(cǎi)用化學鍵(jiàn)合(hé)技術(shù)，表麵(miàn)親水塗層(céng)覆蓋(gài)，因此不僅具有(yǒu)優(yōu)異的(dí)穩定(dìng)性，而(ér)且對蛋白等(děng)生(shēng)物(wù)樣品的非(fēi)特(tè)異性(xìng)吸附(fù)作用(yòng)也非(fēi)常小。精心設計(jì)的大孔體(tǐ)積(jī)可(kě)保(bǎo)證高的(dí)分離容量(liáng)以及(jí)優異的分辨率。由(yóu)於采用創新的(dí)表麵化(huà)學技術(shù)，以(yǐ)及(jí)擁(yōng)有(yǒu)多(duō)種孔徑規格（從100Å到(dào)2000Å），SRT SEC柱可(kě)為(wéi)各種分(fēn)離應用(yòng)提(tí)供(gōng)最高分辨率和(hé)最大(dà)回(huí)收率(shuài)。應用(yòng)領(lǐng)域(yù)覆蓋了(liǎo)大(dà)分(fēn)子(zǐ)量(liáng)的(dí)生物分(fēn)子(zǐ)（如蛋白(bái)質
，核酸(suān)）
，小(xiǎo)分子(zǐ)量的(dí)生物分子(zǐ)（如多肽
，寡(guǎ)核苷(gān)酸(suān)）
，天然聚合物（如(rú)多(duō)糖）
，合(hé)成聚合物
，生(shēng)物細(xì)胞(bāo)（如細菌和(hé)病(bìng)毒）
，納(nà)米材(cái)料(liào)（如(rú)納(nà)米顆(kē)粒）等。

特(tè)點(diǎn):

● 高(gāo)柱(zhù)容量
，高(gāo)分(fēn)辨(biàn)率
● 寬(kuān)的(dí)pH範(fàn)圍(pH範圍2-8.5)
● 使用壽(shòu)命長(cháng)
● 低(dī)鹽(yán)濃(nóng)度洗脫(tuō)，適(shì)合LC-MS分析(xī)
● 對(duì)於生物樣品無(wú)強吸(xī)附
● 極(jí)低的(dí)非特異性(xìng)吸附(fù)，高(gāo)的蛋白回(huí)收率(shuài)及(jí)活(huó)性回(huí)收(shōu)率(shuài)
● 解(jiě)決(jué)多維(wéi)色譜分(fēn)析(xī)應用(yòng)

賽(sài)分(fēn) Sepax HP-C18 液(yè)相(xiāng)色(sè)譜柱4.6mm×250mm

色譜(pǔ)柱的安(ān)裝(zhuāng)和操作(zuò)

色譜柱在(zài)運(yùn)輸過(guò)程(chéng)中或在沒有使用時，它(tā)的兩端(duān)總是用(yòng) 堵頭(tóu)進行密封。當(dāng)將(jiāng)色(sè)譜柱接(jiē)入色(sè)譜儀器係(xì)統(tǒng)時，首(shǒu)先移去 兩端(duān)的(dí)堵(dǔ)頭。請(qǐng)注(zhù)意將流動相流動的(dí)方向與柱(zhù)上標記的(dí)方向 保(bǎo)持(chí)一(yī)致。除(chú)非出(chū)於特(tè)殊考慮，例如為了清除(chú)堵(dǔ)在(zài)色譜柱(zhù)入(rù) 口端的(dí)髒(zàng)汙等而需要將色譜柱反(fǎn)接(jiē)以進行衝洗時，建議用戶 在接(jiē)上(shàng)色譜(pǔ)柱時一定要(yào)遵循(xún)柱(zhù)上標記(jì)的方向(xiàng)。由(yóu)於色(sè)譜柱(zhù)的(dí) 連接是(shì)整(zhěng)個(gè)色譜(pǔ)操作過程(chéng)的(dí)一(yī)部(bù)分(fēn)，如果密封卡套過(guò)緊(jǐn)，或 安裝(zhuāng)不(bù)合(hé)適，或者(zhě)密封卡套(tào)與色譜柱(zhù)端口不匹配(pèi)，都(dū)有可能 導致溶液(yè)的泄漏(lòu)。請(qǐng)按照下(xià)麵步驟將(jiāng)色(sè) ，從(cóng)而將色譜柱(zhù)接入(rù) HPLC 係統： (a) 第一次(cì)使用的管綫，請(qǐng)依(yī)次(cì)將管綫接頭和密封(fēng)卡套(tào)裝在(zài) 徑 1/16"的管(guǎn)綫(xiàn)上。密(mì)封(fēng)卡套的寬口端(duān)應(yīng)朝向管(guǎn)綫(xiàn)接(jiē)頭。 (b) 將管綫緊緊插(chā)入色譜柱(zhù)的(dí)接口，向前滑(huá)動(dòng)密封卡套和(hé)管(guǎn) 綫接(jiē)頭(tóu)，並(bìng)使(shǐ)管綫接頭的(dí) ，然後擰緊(jǐn)管綫(xiàn)接(jiē)頭。 (c) 在用力將管(guǎn)綫壓入(rù) 螺帽(mào)再(zài)進一(yī)步(bù)緊固。 ) 對色譜柱(zhù)的(dí)另(lìng)一端(duān)采(cǎi)用上(shàng)述方(fāng)法進行(háng)操作。 新的(dí) Sepax AAA 柱(zhù)是(shì)置於(yú)甲醇(chún)（或乙(yǐ)腈）水(shuǐ)溶液(yè)中(zhōng)運輸(shū) 的，在(zài)儲存和(hé)運輸過(guò)程中(zhōng)，矽(guī)膠(jiāo)填料可能會幹涸(hé)。這時(shí)推薦 用 10-20 倍(bèi)柱(zhù)體積(jī)的純有機溶劑如甲(jiǎ)醇(chún)
，乙腈(jīng)進(jìn)行衝洗以活(huó)化色譜柱。接著可(kě)用用戶自(zì)己選擇的流(liú)動相衝洗(xǐ)色(sè)譜柱(zhù)。流 速由(yóu) 0.1mL/min 逐漸升至所需(xū)的(dí)操(cāo)作(zuò)條(tiáo)件(jiàn)，直(zhí)至基(jī)綫穩(wěn)定(dìng)為 止(zhǐ)。如果柱(zhù)壓(yā)和基(jī)綫波動較(jiào)大(dà)，這(zhè)可能是(shì)氣泡進(jìn)入(rù)了色(sè)譜柱中(zhōng)這(zhè)時可用較高流速衝洗色(sè)譜柱 2-5 分鐘(zhōng)，例(lì)如(rú)對(duì)於(yú) 4.6x250 mm 的色(sè)譜柱可(kě)采用流速(sù) 1.5mL/min。

樣品和流動(dòng)相(xiāng)

為(wéi)了(liǎo)避免色譜柱(zhù)的堵(dǔ)塞，所(suǒ)有樣(yàng)品(pǐn)和溶劑，包(bāo)括(kuò)緩衝(chōng)溶 液(yè)在(zài)內(nèi)，都必須在使(shǐ)用前(qián)用(yòng) 0.45 μm 或 0.2 μm 的濾(lǜ)膜(mó)過(guò)濾(lǜ)。 Sepax AAA 鍵(jiàn)合(hé)固定(dìng)相(xiāng)的(dí)性質(zhì)為非極(jí)性(xìng)，推薦(jiàn)流動相為有(yǒu)機 試劑與水(shuǐ)的混(hùn)合物(wù)（如甲醇(chún)或乙(yǐ)腈(jīng)的水溶(róng)液等）。流(liú)動相在(zài) 使用(yòng)前(qián)需(xū)要(yào)脫(tuō)氣。一個簡(jiǎn)單(dān)的脫氣(qì)方(fāng)法(fǎ)是將流動(dòng)相在(zài)水(shuǐ)泵(bèng)形成(chéng)的真空下超聲 5 min。當 Sepax AAA 柱用於(yú)梯度洗脫 時，起始(shǐ)流動相通常為(wéi) 5%甲醇（或(huò)乙腈(jīng)）。

色譜(pǔ)柱的(dí)保護

pH 避免在(zài) pH 低(dī)於 2 或(huò)高於 11 的條件(jiàn)下使(shǐ)用(yòng) Sepax AAA 柱。較高的(dí) pH 會溶(róng)解(jiě)矽膠(jiāo)，從而(ér)使(shǐ)部分(fēn)或全(quán)部(bù)的烷(wán)基 鏈從(cóng)矽(guī)膠(jiāo)表(biǎo)麵脫落，引起分(fēn)離效率的(dí) 。為了獲得(dé)最(zuì)佳的分離效(xiào)果和延長柱(zhù)的(dí)使用壽命(mìng)，請(qǐng)盡(jìn)量 使(shǐ)用 pH 在 3 - 7.5 範(fàn)圍內的(dí)流(liú)動相。

壓力(lì) 盡管 Sepax AAA 柱(zhù)可(kě)在(zài)高(gāo)至(zhì) 5000psi 的壓力下(xià)使 用，但正常的(dí)操作壓(yā)力(lì)應當低(dī)於 3000psi。長時間(jiān)在高壓下(xià)運 行會損(sǔn)壞(huài)色譜柱(zhù)。由於(yú)壓(yā)力來源於(yú)流速(sù)，因(yīn)此最(zuì)大 流速將受製(zhì)於係統所能(néng)承受(shòu)的壓(yā)力。一般而(ér)言(yán)，柱(zhù)壓會(huì)隨著(zhuó) 色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)使(shǐ)用時(shí)間(jiān)的(dí)增加(jiā)而(ér)逐漸(jiàn)增加(jiā)。壓力突然(rán)增加(jiā)預示(shì)色譜(pǔ)柱(zhù)入口(kǒu)端的篩(shāi)板(bǎn)發(fā)生了堵(dǔ)塞(sāi)。在(zài)這種情況(kuàng)下(xià)，建議將色(sè)譜(pǔ)柱 反接後(hòu)用適宜的溶(róng)劑(jì)進(jìn)行(háng)衝洗(xǐ)。

溫(wēn)度(dù)

最高操(cāo)作溫度為(wéi) 60o C。長(cháng)時(shí)間在高(gāo)溫(>75o C)下(xià)操(cāo)作(zuò) 也(yě)會損壞色譜柱，這(zhè)種情(qíng)形(xíng)在高的pH (>8)條(tiáo)件下特別(bié)突(tū)出(chū)。

儲藏(cáng) 長(cháng)期不(bù)用(yòng)時，請不要讓(ràng)水或緩(huǎn)衝液(yè)存留(liú)在色譜柱 中(zhōng)。在替代(dài)緩衝液時(shí)，請用(yòng)至少(shǎo) 20-30 倍(bèi)柱體積的 50%甲醇(chún) （或(huò)乙腈）水溶液衝(chōng)洗(xǐ)色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)，再用 20-30 倍柱體(tǐ)積的純有(yǒu)機(jī)溶(róng)劑(jì)如已(yǐ)睛進行衝洗。每(měi)根色(sè)譜柱(zhù)在運(yùn)輸過程(chéng)中均會附有(yǒu) 兩(liǎng)個可拆(chāi)卸(xiè)的(dí)堵頭。為了防(fáng)止(zhǐ)柱床幹涸，請用堵頭塞緊色(sè)譜柱的兩端(duān)。